蔗糖的測定原理
發布時間：2013-11-25
蔗糖是葡萄糖和果糖組成的雙糖，沒有還原性，不能用堿性銅鹽試劑直接測定，但在一定條件下，蔗糖可水解為具有還原性的葡萄糖和果糖。因此，可以用測定還原糖的方法測定蔗糖含量。
這里介紹還原糖法。
1．原理
樣品脫脂后，用水或乙醇提取，提取液經澄清處理以除去蛋白質等雜質，再用鹽酸進行水解，使蔗糖轉化為還原糖。然后按還原糖測定方法分別測定水解前后樣品液中還原糖含量，兩者差值即為由蔗糖水解產生的還原糖量，乘以一個換算系數即為蔗糖含量。
2．儀器
①25mL古氏坩堝或G4垂融坩堝。
②真空泵。
③滴定管。
④水浴鍋。
3．試劑
①6mol·L-1鹽酸溶液。
②5mol·L-1氫氧化鈉溶液：稱取20g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。
③lmol·L-1氫氧化鈉溶液：稱取4g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。
④費林試劑甲液：稱取34．639g硫酸銅(CuSO4·5H2O)，加適量水溶解，加人0．5mL硫酸，加水稀釋至500mL，用精制石棉過濾。
⑤費林試劑乙液；稱取173g酒石酸鉀鈉和50g氫氧化鈉，加適量水溶解并稀釋到500mL，用精制石棉過濾，貯存于橡皮塞玻璃瓶中。
⑥精制石棉：取石棉先用3 mol·L-1鹽酸浸泡2～3h，用水洗凈，再用10％氫氧化鈉浸泡2～3h。傾去溶液，再用堿性酒石酸銅乙液浸泡數小時，用水洗凈，再以3 mol·L-1鹽酸浸泡數小時，用水洗至不呈酸性。加水振蕩，使之成為微細的漿狀軟纖維，用水浸泡并貯存于玻璃瓶中，即可用于填充古氏坩堝。
⑦0．02mol·L-1高錳酸鉀標準溶液：稱取3．3g高錳酸鉀溶于1050mL水中，緩緩煮沸
20～30min，冷卻后于暗處密閉保存數日，用垂融漏斗過濾，保存于棕色瓶中。
標定：精確稱取150～200℃干燥1～1．5h的基準草酸鈉約0．2g，溶于50mL水中；加80mL硫酸，用配制的高錳酸鉀溶液滴定，接近終點時加熱至70℃，繼續滴至溶液呈粉紅色30s不褪為止。同時作空白試驗。
計算：
c＝[﹙m×1000﹚÷134﹙V－V0﹚] ×﹙2／5﹚
式中：c——高錳酸鉀標準溶液的濃度，mol·L-1；
m——草酸鈉質量，g；
V——標定時消耗高錳酸鉀溶液體積，mL；
V0——空白消禍高錳酸鉀溶液體積，mL；
134——草酸鈉的摩爾質量，g·moL-1。
⑧硫酸鐵溶液：稱取50g硫酸鐵，加人200mL水溶解后加入100mL硫酸，冷卻后加水稀釋至1000mL。
⑨3mol·L-1鹽酸溶液：量取30mL濃鹽酸，加水稀釋至120mL。
⑩甲基紅乙醇溶液(0．1％)：稱取0．1g甲基紅，用60％乙醇溶解并定容到100mL。
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